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土壤脲酶检测试剂盒说明书
更新时间:2020-09-02 点击量:1731

货号:YJS2224                                                 规格:50管/24样

土壤脲酶检测试剂盒说明书

可见分光光度法

产品简介:

S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和*氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。

利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

产品内容:

试剂一:甲苯10ml×1瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:粉剂×1瓶,临用前加入20ml蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;

试剂三:液体65ml×1瓶,4℃保存;

试剂四A液:液体1ml×1瓶,4℃保存;试剂四B液:液体4ml×1瓶,4℃保存;临用前将A液倒入B液中混合,待用;4℃保存一周

试剂五:液体5ml×1瓶,4℃保存;

操作步骤:  

  • 培养  

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.25

0.25

试剂一(μl

125

125

振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置15min

试剂二(μl

625

 

蒸馏水(μl

 

625

试剂三(μl

1250

1250

混匀,放入37水浴培养24h后,10000g常温离心10min,取上清液。

  • 将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1ml上清液,加入0.9ml蒸馏水)。

 

 

 

3、测氨量

 

测定管

对照管

稀释后的上清液(μl

400

400

试剂四(μl

80

80

试剂五(μl

60

60

充分混匀,室温放置20min

蒸馏水(μl

460

460

混匀,578nm处蒸馏水调零,测A值,ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

脲酶活力的计算:

标准条件下测定的回归方程为y=0.0915x+0.0373;x为标准品浓度(μg/ml),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1μgNH3-N定义为一个酶活力单位。

脲酶活力(U/g 土样)=(ΔA-0.0373)÷0.0915×10×V反总÷W÷T=874×(ΔA-0.0373)

10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V反总:反应体系总体积:2ml;W:样本质量,0.25g。

 

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