货号:YJS2224 规格:50管/24样
土壤脲酶检测试剂盒说明书
可见分光光度法
产品简介:
S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和*氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
产品内容:
试剂一:甲苯10ml×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1瓶,临用前加入20ml蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;
试剂三:液体65ml×1瓶,4℃保存;
试剂四A液:液体1ml×1瓶,4℃保存;试剂四B液:液体4ml×1瓶,4℃保存;临用前将A液倒入B液中混合,待用;4℃保存一周
试剂五:液体5ml×1瓶,4℃保存;
操作步骤:
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样(g) | 0.25 | 0.25 |
试剂一(μl) | 125 | 125 |
振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置15min | ||
试剂二(μl) | 625 |
|
蒸馏水(μl) |
| 625 |
试剂三(μl) | 1250 | 1250 |
混匀,放入37℃水浴培养24h后,10000g常温离心10min,取上清液。 |
3、测氨量
| 测定管 | 对照管 |
稀释后的上清液(μl) | 400 | 400 |
试剂四(μl) | 80 | 80 |
试剂五(μl) | 60 | 60 |
充分混匀,室温放置20min | ||
蒸馏水(μl) | 460 | 460 |
混匀,578nm处蒸馏水调零,测A值,ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
脲酶活力的计算:
标准条件下测定的回归方程为y=0.0915x+0.0373;x为标准品浓度(μg/ml),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1μgNH3-N定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(U/g 土样)=(ΔA-0.0373)÷0.0915×10×V反总÷W÷T=874×(ΔA-0.0373)
10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V反总:反应体系总体积:2ml;W:样本质量,0.25g。
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